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铜与钯之间的协同效应使得CuPd双金属纳米酶成为潜在的肿瘤生物催化剂候选材料。然而，其实际催化活性与表面修饰方式和结构特征密切相关。本研究采用一步还原法，以不同链长的烷基胺配体（十甲胺（DA）、十二甲胺（DDA）、十六甲胺（HDA）和十八甲胺（ODA））为表面配体，制备了多种CuPd纳米酶，以探究由配体形成的**表面自组装单分子层（SAMs）对其性能的影响。通过透射电子显微镜（TEM）、X射线光电子能谱（XPS）和X射线衍射（XRD）的表征结果显示，四种CuPd纳米酶在结构、尺寸和组成上均较为相似。然而，CuPd@DA和CuPd@HDA表现出更高的类Fenton反应活性，这是由于其形成的SAMs具有较低的空间位阻和较薄、较有序的层状结构。相比之下，CuPd@DDA和CuPd@ODA因烷基胺链长较长，形成较厚且堆叠的SAMs，导致其生物催化活性较弱。体外抗肿瘤细胞毒性实验结果显示，CuPd@DA（IC?? = 104.6 μg/mL）和CuPd@HDA（IC?? = 118.6 μg/mL）具有较低的半数抑制浓度，而CuPd@DDA和CuPd@ODA的IC??值较高，进一步证明了表面SAMs引起的生物催化性能差异。本研究从表面自组装单分子层（SAMs）调控的角度，为优化双金属纳米酶的生物催化效应提供了新的见解与设计思路。